การผลิตชุดตรวจสอบสารแอฟลาทอกซิน เอ็ม 1 แบบ DC-ELISA IDC-ELISA และ Lateral Flow เพื่อการขยายผลเชิงพาณิชย์
- นักวิจัย
- อมรา ชินภูติ
- หน่วยงาน
- กองวิจัยและพัฒนาวิทยาการหลังการเก็บเกี่ยวและแปรรูปผลิตผลเกษตร
- ปีที่สิ้นสุด
- 2555
- ยอดเข้าชม
- 15
จุดเด่นของเทคโนโลยี
ใช้งานง่าย สามารถตรวจน้ำนมดิบ นมพาสเจอร์ไรส์ และนมยูเอชที ได้ทันทีโดยไม่ต้องเตรียมตัวอย่าง
บทคัดย่อ
แอฟลาทอกซิน M1 (AFM1) เป็นสารอนุพันธ์ของสารแอฟลาทอกซิน B1 (AFB1) เป็นสารก่อมะเร็งที่พบปนเปื้อนในน้ำนมของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เพื่อการตรวจสอบที่รวดเร็วและแม่นยำ การทดลองนี้ได้พัฒนาวิธีการตรวจสาร AFM1ในน้ำนม 3 รูปแบบ คือ Direct Competitive ELISA Indirect Competitive ELISA และ Competitive Lateral Flow Immunoassay โดยนำแอนตีซีรั่มต่อสาร AFM1 (IgG) แบบ Polyclonal ที่ผลิตขึ้นเองมาใช้พัฒนาชุดตรวจสอบ การพัฒนาแบบ Direct Competitive ELISA ต้องเตรียมสาร AFM1-HRP conjugate สามารถเตรียมได้ 5 มิลลิลิตร ความเข้มข้น 1:1,280 ในการตรวจ จะเคลือบหลุมทดสอบด้วย IgG ต่อสาร AFM1 ผลการทดสอบพบว่าวิธีนี้ให้ผลการวิเคราะห์ไม่เสถียร ขณะที่วิธี Indirect Competitive ELISA จะเคลือบหลุมทดสอบด้วย AFM1-BSA โดยมี IgG ต่อสาร AFM1 ทำปฏิกิริยากับสาร AFM1 ในตัวอย่างน้ำนม และมี 2nd antibody-HRP เป็นตัวแสดงผลการวิเคราะห์ ผลการทดสอบ ได้กราฟมาตรฐานที่มีค่า R2= 0.992 การวิเคราะห์สารพิษที่เติมลงในน้ำนม (% Recovery) ได้ดีเท่ากับวิธี LC-MS/MS และมีค่า LOD = 0.146 ใช้เวลาในการวิเคราะห์ 2 ชั่วโมง การทดสอบความชำนาญกับ FAPAS ได้ค่า Z-score เท่ากับ -1.1 ชุดตรวจสอบสามารถเก็บนาน 6 เดือน การพัฒนาชุดตรวจสอบแบบ Competitive Lateral Flow Immunoassay ได้นำอนุภาคทองมาเชื่อมต่อกับ IgG และทำปฏิกิริยากับ สาร AFM1 ในตัวอย่างบนแผ่นไนโตรเซลลูโลส สามารถตรวจสาร AFM1 ในน้ำนมได้ต่ำสุด 0.5 นาโนกรัม/มิลลิลิตร ใช้เวลา 10 นาที มีความแม่นยำเทียบเท่าวิธี LC-MS/MS เป็นชุดตรวจสอบที่ใช้งานง่าย สามารถตรวจน้ำนมดิบ นมพาสเจอร์ไรส์ และนมยูเอชที ได้ทันทีโดยไม่ต้องเตรียมตัวอย่าง และได้นำชุดตรวจสอบนี้ ไปทดสอบการใช้งานจริงในภาคสนาม ที่ศูนย์รวบรวมน้ำนมดิบของวิทยาลัยเกษตรและเทคโนโลยีลพบุรี อำเภอพัฒนานิคม จังหวัดลพบุรี สามารตตรวจน้ำนมดิบของเกษตรกร จำนวน 32 ราย ภายในเวลา 1 ชั่วโมง ซึ่งผู้รับซื้อน้ำนมดิบพอใจในการใช้ชุดตรวจสอบ AFM1 Strip test ที่พัฒนาขึ้นนี้เป็นอย่างมาก
แสดงความคิดเห็น (0)
ยังไม่มีความคิดเห็น เป็นคนแรกที่แสดงความคิดเห็นได้เลย